常用的Elisa法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于大分子抗原，后者用于測(cè)定特異抗體。
選擇Elisa試劑盒需要考慮哪些方面？
1.首先是確定要檢測(cè)的靶標(biāo)蛋白，并通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)資料查詢?cè)跇颖局械谋磉_(dá)水平，這點(diǎn)在對(duì)比試劑盒的時(shí)候需要確定試劑盒的檢測(cè)范圍是否滿足要求。
2.明確試劑盒的應(yīng)用種屬和檢測(cè)的樣本類型。除試劑盒特殊說(shuō)明外，一般情況下，不同種屬不能通用。常見(jiàn)的待測(cè)樣本類型有：血清、血漿、細(xì)胞上清、組織勻漿、細(xì)胞裂解液等。實(shí)驗(yàn)前，需要判斷試劑盒能否滿足目標(biāo)物種的目標(biāo)蛋白檢測(cè)。
Elisa試劑盒的8大質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
1、稀釋線性：指樣本稀釋線性，即：將樣本梯度稀釋，看各稀釋梯度濃度是否呈線性；對(duì)于高濃度樣本，建議選擇OD值落在標(biāo)曲范圍中部的稀釋倍數(shù)為最佳稀釋倍數(shù)。
2、回收率：評(píng)估試劑盒測(cè)量結(jié)果趨于真實(shí)值程度的指標(biāo)。一般添加標(biāo)準(zhǔn)品（重組蛋白）到天然樣本基質(zhì)內(nèi)，進(jìn)行測(cè)定。通常，線性及回收率的范圍在80%-120%比較合適。
3、樣本值：確保試劑盒可以檢測(cè)天然樣本的類型。可根據(jù)靶蛋白性質(zhì)對(duì)天然樣本進(jìn)行選擇，例如，血清、血漿、細(xì)胞上清、尿液、唾液組織勻漿液等。
4、特異性：
通過(guò)交叉反應(yīng)評(píng)估試劑盒的特異性，交叉反應(yīng)越小，說(shuō)明試劑盒的特異性好，交叉反應(yīng)小，說(shuō)明試劑盒的特異性好，與同家族其他蛋白或結(jié)構(gòu)類似物的交叉反應(yīng)，與其他種屬相同靶點(diǎn)蛋白或結(jié)構(gòu)類似物的交叉反應(yīng)，與血清中常見(jiàn)因子的交叉反應(yīng)。
5、校準(zhǔn)：
每個(gè)試劑盒包含的標(biāo)準(zhǔn)品都應(yīng)該是高純度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白，用來(lái)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線。
6、穩(wěn)定性：
判斷試劑盒在規(guī)定條件下的儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng)短的標(biāo)準(zhǔn)。一般通過(guò)熱加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。將試劑盒在37℃條件下放置7天，與4℃條件下放置的相同產(chǎn)品進(jìn)行比價(jià)。各項(xiàng)性能檢測(cè)結(jié)果的偏差均應(yīng)<15%。
7、精密度：試劑盒重復(fù)實(shí)驗(yàn)室時(shí)，誤差大小的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)。通常用CV表示。一把情況下，批間、批內(nèi)變異系數(shù)（CV）均應(yīng)<15%。
8、靈敏度：試劑盒靈敏度的判定標(biāo)準(zhǔn)。最低檢測(cè)限的值越低，表明試劑盒越靈敏。如果待檢指標(biāo)含量很低，需要選擇高靈敏的Elisa試劑盒。
如何選擇試劑盒？
首先需要選擇滿足符合種屬要求，檢測(cè)樣本類型，檢測(cè)范圍在靶標(biāo)蛋白水平之內(nèi)試劑盒，其次根據(jù)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，選擇交叉反應(yīng)小，靈敏度高，穩(wěn)定性好的試劑盒。推薦選擇品牌比較好，例如進(jìn)口的ABcam，R&D，Biorbyt，國(guó)內(nèi)品牌Elabscience，聯(lián)科等。·
