文獻(xiàn)鏈接：Individualized, heterologous chimpanzee adenovirus and self-amplifying mRNA neoantigen vaccine for advanced metastatic solid tumors: phase 1 trial interim results
發(fā)表期刊：Nature Medicine
影響因子：87
發(fā)表時(shí)間：2022年8月
單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序用于臨床I/II期--藥效評(píng)估與安全性機(jī)制研究
該臨床試驗(yàn)已經(jīng)推進(jìn)到II/III期，招募非小細(xì)胞肺癌，結(jié)直腸癌，胃食管腺癌，尿路上皮癌：A Study of a Personalized Neoantigen Cancer Vaccine-NCT03639714
0. 研究背景
先前的研究結(jié)果表明，一種成功的癌癥疫苗應(yīng)有以下5個(gè)特征：(1)靶向腫瘤特異性新抗原，(2)使用高免疫原性疫苗平臺(tái)(s)，(3)足以刺激機(jī)體擴(kuò)增和啟動(dòng)T細(xì)胞反應(yīng)，(4)與CPI治療結(jié)合，(5)產(chǎn)生長(zhǎng)期記憶反應(yīng)。
在這項(xiàng)最新研究中，研究團(tuán)隊(duì)以個(gè)性化、異源黑猩猩腺病毒（ChAd68）和委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒samRNA載體為基礎(chǔ)的新抗原疫苗作為主要研究端點(diǎn)，評(píng)估其安全性和耐受性等指標(biāo)。
1. 臨床前實(shí)驗(yàn)
在NHPs中評(píng)估了針對(duì)猴免疫缺陷病毒（SIV）模型抗原的免疫應(yīng)答的效力和作用時(shí)間，以及皮下注射抗CTLA-4的影響
理解備注：恒河猴的組織相容性復(fù)合體命名為MAMU（就如同人類的被稱為HLA）；NHP特異性MAMU-A*01限制性SIV抗原插入到ChAd68和samRNA疫苗平臺(tái)
1.1 疫苗接種誘導(dǎo)NHPs中持久的CD8+ T細(xì)胞應(yīng)答
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：
- （1）疫苗接種方案：對(duì)MAMU-A*01陽(yáng)性的恒河猴（n=11）進(jìn)行肌肉注射ChAd68疫苗首次激發(fā)免疫，接下來(lái)的第4、12和20周時(shí)通過(guò)肌肉注射samRNA疫苗增強(qiáng)免疫，第32周再給予ChAd68增強(qiáng)型疫苗，第106周（n=11）再給予samRNA增強(qiáng)型疫苗（圖1）
- （2）CPI治療方案：以上參與疫苗接種方案的恒河猴中（n=11），其中部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（n=6）伴隨使用伊匹單抗（CTLA-4單抗），部分（n=5）未接受CPI治療
圖1. 研究治療計(jì)劃示意圖
- ChAd68疫苗誘導(dǎo)了對(duì)所有六種抗原的免疫反應(yīng)：在給予samRNA后，啟動(dòng)的T細(xì)胞反應(yīng)增強(qiáng)，兩組患者在啟動(dòng)32周后仍可檢測(cè)到T細(xì)胞反應(yīng)；同時(shí)給予注射伊匹單抗可維持整體較高的T細(xì)胞反應(yīng)（圖2b）
- 增強(qiáng)型ChAd68疫苗能顯著刺激免疫反應(yīng)：第32周再給予ChAd68使T細(xì)胞反應(yīng)分別增加12-15倍（圖2c）
-
增強(qiáng)型samRNA疫苗能顯著刺激免疫反應(yīng)：第106周再給予samRNA疫苗，在第107周檢測(cè)到的抗原特異性T細(xì)胞反應(yīng)增加8-17倍（圖2d）
圖2. 用ChAd68和samRNA進(jìn)行異源疫苗接種可誘導(dǎo)NHPs中廣泛、持久的CD8+ T細(xì)胞反應(yīng)，這些反應(yīng)可長(zhǎng)期檢測(cè)到（注射2年后仍然顯著提高）；圖b. 抗原特異性T細(xì)胞反應(yīng)評(píng)估：研究不同組在不同時(shí)間點(diǎn)的T細(xì)胞反應(yīng)；圖c.ChAd68增強(qiáng)前后（32th周和33th周）抗原特異性T細(xì)胞反應(yīng)：每只動(dòng)物對(duì)所有抗原的平均反應(yīng)；圖d. samRNA增強(qiáng)前后（106th周和107th周）抗原特異性T細(xì)胞反應(yīng)：每只動(dòng)物對(duì)所有抗原的平均反應(yīng)
2. 臨床實(shí)驗(yàn)
針對(duì)個(gè)體化預(yù)測(cè)的腫瘤疫苗的免疫反應(yīng)以及疫苗引起的T細(xì)胞多樣性分析在臨床I/II期實(shí)驗(yàn)進(jìn)行
研究對(duì)象：轉(zhuǎn)移型MSS晚期結(jié)直腸癌；非小細(xì)胞肺癌；胃食管腺癌
研究第1期的主要終點(diǎn)是安全性、耐受性和RP2D。
次要和探索性終點(diǎn)包括免疫原性、OS、制造患者特異性疫苗的可行性和ctDNA的變化。
所有患者中（包括疫苗接種前缺乏免疫反應(yīng)的MSS-CRC患者）均觀察到腫瘤新生抗原誘導(dǎo)的特異性CD8+ T細(xì)胞。同時(shí)，ctDNA減少，疾病穩(wěn)定，腫瘤體積縮小的特征都表明該手段在CPI難治型患者中存在潛在的臨床有效性。
在腫瘤I期臨床試驗(yàn)中，主要目的是為了找到 II期推薦劑量（RP2D） 或者 MTD（最大耐受劑量）；總生存（overall survival，OS），定義為：從隨機(jī)化開始至（因任何原因）死亡的時(shí)間。
1. 方案設(shè)計(jì)：（參考圖4a）
入組患者：符合條件的患者共計(jì)14位：中位年齡為59歲；腫瘤類型包括轉(zhuǎn)移性MSS-CRC（n=7）、GEA（n=6）或NSCLC（n=1）
疫苗生產(chǎn)：對(duì)于每個(gè)累計(jì)預(yù)測(cè)新抗原評(píng)分達(dá)到30的患者，篩選20個(gè)排名最高的突變納入密碼子優(yōu)化的疫苗表達(dá)盒中。為15名登記的患者生產(chǎn)了患者特異性疫苗（證實(shí)這種個(gè)體化疫苗接種方法的生產(chǎn)可行性），后續(xù)有1位患者放棄接受研究治療。
疫苗注射：ChAd68疫苗注射單針后，后續(xù)多次靜脈注射samRNA疫苗，疫苗劑量分3個(gè)梯度（30ug, 100ug, 300ug）
CPI治療方案：14例患者接受疫苗接種和每月的靜脈注射PD-1抗體（尼魯單抗，每4周480mg），另外，dose level 3和dose level 4的患者也同時(shí)接種伊匹單抗（30mg）
其他：4例患者（G1、G8、G9和G10）繼續(xù)接受了研究治療的標(biāo)準(zhǔn)護(hù)理化療，8例患者在初次接種疫苗24周后接受了單一的加強(qiáng)型ChAd68疫苗2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：（參考圖3）
圖3. 概述個(gè)性化疫苗生產(chǎn)、計(jì)劃給藥計(jì)劃和免疫監(jiān)測(cè)的示意圖
2.1 個(gè)體化疫苗方案安全、耐受性良好
- 個(gè)性化疫苗治療相關(guān)副反應(yīng)低：發(fā)熱（86%）、疲勞（43%）、肌肉骨骼和注射部位疼痛（均為36%)和腹瀉（29%）；嚴(yán)重的TRAEs與已知的CPI治療的安全性基本一致，包括發(fā)熱、十二指腸炎、轉(zhuǎn)氨酶增加和甲狀腺功能亢進(jìn)各一個(gè)計(jì)數(shù)（圖4b）
2.2 疫苗誘導(dǎo)新抗原特異性免疫應(yīng)答長(zhǎng)效持久
設(shè)計(jì)了個(gè)體患者最小表位（8-11mer）肽池（包括40個(gè)排名最高的預(yù)測(cè)新表位），標(biāo)記為 CD8 pool，用于取患者PBMC通過(guò)與對(duì)應(yīng)肽池孵育刺激IFN-γ反應(yīng)，然后體外ELISpot檢測(cè)IFN-γ反應(yīng)強(qiáng)度
- ChAd68疫苗顯著誘導(dǎo)新抗原特異性CD8+ T細(xì)胞：接種疫苗前，只有15%的患者對(duì)新生抗原肽池的反應(yīng)超過(guò)LOD值；疫苗接種后均顯著提升（圖4c）
- ChAd68疫苗誘導(dǎo)的T細(xì)胞應(yīng)答長(zhǎng)效持久：在3例現(xiàn)有縱向樣本中，第52周仍然檢測(cè)到抗原特異性T細(xì)胞的高效應(yīng)答（圖5 A,B）
- 更低的劑量和更長(zhǎng)的間隔可能有助于samRNA平臺(tái)驅(qū)動(dòng)T細(xì)胞反應(yīng)：患者G1（GEA，伴隨化療）中，T細(xì)胞在samRNA增強(qiáng)疫苗注射的8周間隔內(nèi)擴(kuò)大了1.5倍，并在第52周給予samRNA疫苗后的16周內(nèi)持續(xù)保持>700 SFU/10^6細(xì)胞；G3患者（NSCLC）中，觀察到在第24周和第36周時(shí)，samRNA劑量之間的CD8+ T細(xì)胞反應(yīng)增加了7倍；患者G2（GEA）T細(xì)胞反應(yīng)在第4周至第13周的（9周）samRNA給藥間隔期間顯示~1.5倍的T細(xì)胞反應(yīng)增加（圖5A,C）
2019年新冠病毒限制期間，samRNA給藥間隔延長(zhǎng)了8-16周，揭示了samRNA增強(qiáng)T細(xì)胞反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的有趣見(jiàn)解
2.3 CD8+ T細(xì)胞可以識(shí)別多個(gè)HLA等位基因中的新抗原
因?yàn)?CD8 pool 這種探索最小表位池設(shè)計(jì)不包括每種突變對(duì)應(yīng)的所有潛在新抗原（即，太短了），并且不成比例地支持較高預(yù)測(cè)分?jǐn)?shù)的突變抗原形式，因而作者額外設(shè)計(jì)了稱為 15 mer pool的表位池
- 較長(zhǎng)的抗原肽誘導(dǎo)抗原特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)需要混合CD4 T細(xì)胞參與：在5例有可用樣本（G1、G2、G8、G8、G11和G14）的患者中，分析了對(duì)同源CD8 pool和15mer pool的CD8和CD4 T細(xì)胞偏倚的反應(yīng)。根據(jù)肽長(zhǎng)度的預(yù)期，CD8 pool刺激后的IFN-γ反應(yīng)是由CD8 T細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的，而對(duì)15mer pool刺激的反應(yīng)是CD8驅(qū)動(dòng)或混合CD4/CD8 T細(xì)胞反應(yīng)（圖6）
- 個(gè)性化疫苗能夠激活多種抗原特異性T細(xì)胞：所有12例患者在治療后的時(shí)間點(diǎn)均可檢測(cè)到T細(xì)胞對(duì)多個(gè)突變的反應(yīng)（圖7a）
- CD8+ T細(xì)胞可以識(shí)別多個(gè)HLA等位基因中的新抗原：G1,G2,G8患者的混合白細(xì)胞pool對(duì)3位患者個(gè)性化疫苗中>50%的多個(gè)HLA等位基因中的新抗原產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)（圖7b,c）
Peptide-HLA (pHLA)四聚體被生成，用于評(píng)估抗原特異性T細(xì)胞的廣度和記憶表型。基于G1,G2,G8的HLA設(shè)計(jì)pHLA與對(duì)應(yīng)的T細(xì)胞孵育
- 個(gè)性化疫苗誘導(dǎo)的特異性T細(xì)胞具有較強(qiáng)的記憶特性：與總CD8 T細(xì)胞相比，四聚體陽(yáng)性CD8 T細(xì)胞的效應(yīng)記憶特征高1.3-1.5倍，幼稚T細(xì)胞的頻率低20倍（圖7d）
- ChAd68 boost疫苗顯著提高患者抗原特異性效應(yīng)記憶細(xì)胞比例：患者G1的ChAd68 boost導(dǎo)致四聚體陽(yáng)性細(xì)胞增加10倍，增強(qiáng)后四聚體陽(yáng)性CD8 T細(xì)胞由≥93%的效應(yīng)記憶細(xì)胞組成（圖7e）。
2.4 疫苗誘導(dǎo)CD8+ T細(xì)胞是多功能的，可以殺死靶細(xì)胞
評(píng)估該疫苗方案可以誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T細(xì)胞，殺死在MHCI類環(huán)境中呈現(xiàn)同源表位的靶細(xì)胞
細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色 (ICS) 是一種非常有用且廣泛使用的基于流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)方法，可檢測(cè)細(xì)胞刺激后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)細(xì)胞因子的產(chǎn)生和積累。染色原理： 使用特定肽或非特異性激活混合物激活細(xì)胞---->添加蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑（例如布雷非菌素 A）以將細(xì)胞因子保留在細(xì)胞內(nèi)---->洗滌后，可以將針對(duì)其他細(xì)胞標(biāo)志物的抗體添加到細(xì)胞懸液中---->然后將細(xì)胞固定在多聚甲醛中并透化---->加入抗細(xì)胞因子抗體---->細(xì)胞可通過(guò)流式細(xì)胞儀分析
- 抗原特異性CD8+ T細(xì)胞是多功能的：通過(guò)IVS體外培養(yǎng)將G2和G8的PBMCs與CD8 pool孵育擴(kuò)增，檢測(cè)到IFN-γ+，CD107α+，腫瘤壞死因子α（TNF-α）+和白細(xì)胞介素-2（IL-2）+CD8T細(xì)胞，增加2~700倍（圖8a）；布爾門控證實(shí)了兩名患者均存在四、三、雙陽(yáng)性多功能CD8 T細(xì)胞（圖8b）
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抗原特異性CD8 T細(xì)胞能夠殺死呈遞新抗原的靶細(xì)胞：將G2患者的抗原特異性T細(xì)胞與同型抗原肽表達(dá)的靶細(xì)胞共孵育，能夠顯著降低靶細(xì)胞活性（圖8c）
圖8. 腫瘤新抗原反應(yīng)性CD8 T細(xì)胞具有功能多樣性，能夠殺死HLA呈現(xiàn)目標(biāo)同源肽的腫瘤細(xì)胞；圖a. G2患者經(jīng)DMSO或患者特異性CD8 pool刺激后產(chǎn)生IFN-γ、CD107α、TNF-α和IL-2流式分析圖；圖b. 通過(guò)CD8+細(xì)胞因子+群體的布爾門控評(píng)估多功能性：餅狀圖顯示了體外pbmc和IVS后pbmc的多功能性，餅弧用紅色（CD107α）、石灰綠色（IFN-γ）、綠松石色（TNF-α）和海軍藍(lán)（IL-2）表示單個(gè)細(xì)胞因子，餅類部分描述了表達(dá)多種細(xì)胞因子的細(xì)胞的頻率（詳細(xì)參考下方圖例，不同顏色表示不同陽(yáng)性類別），主要功能劃分為紅色（CD107α、IFN-γ、TNF-α和IL-2呈四倍陽(yáng)性）、橙色（CD107α、IFN-γ和TNF-α呈三倍陽(yáng)性）和黃色（CD107α和IFN-γ呈雙陽(yáng)性）
2.5 疫苗誘導(dǎo)的T細(xì)胞實(shí)現(xiàn)腫瘤浸潤(rùn)
實(shí)驗(yàn)分組：患者治療前和治療后
樣本類型：腫瘤穿刺組織和PBMC
實(shí)驗(yàn)類型： 腫瘤穿刺組織（基因組測(cè)序）；PBMC樣本（scRNA-seq & TCR-seq）
圖9. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)概覽
單細(xì)胞測(cè)序結(jié)論：
與基線水平相比，治療后樣本中的新抗原反應(yīng)性CD8+ T細(xì)胞增加了1.6倍至6.4倍（圖10 b）
對(duì)轉(zhuǎn)錄激活特征的分析證實(shí)了CD8+ T細(xì)胞在處理后的樣本中顯著富集（圖10 c）
TCR分析顯示，在G1和G3患者接種疫苗后，PBMCs中分別檢測(cè)到12種和30種不同的 TCR克隆型（de novo + expanded）（圖10 b）。
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通過(guò)對(duì)T細(xì)胞各克隆型中IFNG、GZMB、TNFA和IL2轉(zhuǎn)錄本的分析顯示，與基線水平相比，兩名患者在治療后的樣本中表達(dá)兩種或兩種以上細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄本的頻率增加了12-98倍（圖10 d，e）
圖10. 單細(xì)胞測(cè)序結(jié)論；圖B. Post-IVS ELISpot分析：基線(W0、橙色），治療(W16；藍(lán)色）時(shí)間點(diǎn)對(duì)應(yīng)于G1和G3患者治療時(shí)的腫瘤活檢樣本（W16），TCR克隆型分析來(lái)源于PBMC scRNA-seq；圖C. 小提琴圖顯示了G1和G3患者的基線（橙色）和治療時(shí)（藍(lán)色）PBMC樣本中CD3、CD4和CD8 mRNA表達(dá)的分析；圖D. UMAP圖顯示了處理樣本中表達(dá)TCR克隆型的單個(gè)細(xì)胞（封閉的圓圈，G1=12，G3=27），并表達(dá)0、1、2、3或4個(gè)細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄本；圖E. UMAP圖顯示個(gè)體細(xì)胞表達(dá)≤1（藍(lán)色）和≥2細(xì)胞因子（紅色）和感興趣的TCR克隆型（G1為=12，G3為=27），比較基線和處理樣本
來(lái)自G1和G3患者的基線和治療時(shí)的腫瘤活檢樣本通過(guò)批量DNA測(cè)序分析TCR-β CDR3序列的存在。通過(guò)PBMCs中的單細(xì)胞RNA測(cè)序獨(dú)立獲得的TCR-β CDR3序列與腫瘤樣本中的DNA測(cè)序的分析表明，血液和腫瘤中假定的新抗原特異性T細(xì)胞存在重疊。
- 對(duì)于患者G1，在基線和治療時(shí)的腫瘤樣本中發(fā)現(xiàn)了341個(gè)TCR-β CDR3克隆型，其中治療期顯著富集了9個(gè)克隆，其中的2種也在治療時(shí)活檢時(shí)取樣的PBMCs中被發(fā)現(xiàn)（圖11d）
- 在患者G3中，通過(guò)基線和治療時(shí)的腫瘤樣本DNA測(cè)序共鑒定出294個(gè)TCR-β CDR3克隆型，其中40個(gè)克隆型在治療時(shí)的樣本中顯著富集。在治療時(shí)活檢中富集的40個(gè)TCR-β CDR3克隆型中的5個(gè)與在治療時(shí)活檢時(shí)在PBMCs中激活的TCR克隆型重疊（圖11d）
結(jié)論：腫瘤組織中新抗原特異性CD8 T細(xì)胞的克隆型，提供了疫苗誘導(dǎo)的周圍新抗原特異性T細(xì)胞能夠浸潤(rùn)腫瘤的概念證明
2.6 MSS-CRC患者存活時(shí)間延長(zhǎng)，ctDNA含量降低
評(píng)估指標(biāo)：OS和通過(guò)成像評(píng)估的腫瘤大小的變化（RECIST v1.1，次要終點(diǎn)），轉(zhuǎn)錄譜和ctDNA的變化（探索終點(diǎn)）。
根據(jù)RECIST v1.1（實(shí)體瘤療效評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)），客觀緩解率和無(wú)進(jìn)展生存期顯示一個(gè)GEA患者有完全緩解，以及多個(gè)腫瘤類型的患者病情穩(wěn)定（SD）?？紤]到在幾例MSS-CRC患者中觀察到的SD，作者重點(diǎn)分析了這7例MSS-CRC患者的OS次要終點(diǎn)和ctDNA較基線變化的探索性終點(diǎn)。對(duì)于MSS-CRC患者，7例患者中有3例（42.9%）仍然存活，12個(gè)月的OS率為42.9%，反映了多個(gè)患者經(jīng)歷了持久的獲益。新的證據(jù)表明，治療時(shí)ctDNA水平相對(duì)于基線的變化是一個(gè)有用的生物標(biāo)志物，可以將患者分為有分子應(yīng)答者或無(wú)分子應(yīng)答者，并區(qū)分預(yù)后良好的患者，特別是那些根據(jù)RECIST v1.1標(biāo)準(zhǔn)有SD的患者。
本研究隊(duì)列皆為CPI難治性的冷腫瘤： 在患者治療前的腫瘤活檢樣本中，分析了對(duì)CPIs敏感性腫瘤的標(biāo)準(zhǔn)基因組相關(guān)性（即腫瘤突變負(fù)擔(dān)、CD274（PD-L1）和IFNG RNA測(cè)序特征），并與癌癥基因組圖譜（TCGA）中的相關(guān)癌癥類型進(jìn)行了比較。預(yù)處理患者基因組數(shù)據(jù)顯示，本研究中MSS-CRC和GEA患者的腫瘤突變負(fù)荷較低，PD-L1表達(dá)較低，且這些腫瘤的免疫反應(yīng)性較低（圖12 a,b）。這種冷性腫瘤已知對(duì)CPI治療是難治性的。
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長(zhǎng)期接受疫苗治療患者ctDNA明顯降低： 在這些患者中，100%（3/3）治療時(shí)間<6個(gè)月的ctDNA濃度增加，而療程≥6個(gè)月的75%（3/4）患者表現(xiàn)出分子反應(yīng)（<較基線水平50%；圖12c）。2例患者在治療期間ctDNA完全清除（G8和G14；圖12c）。最值得注意的是，這些ctDNA的這些下降在OS延長(zhǎng)的患者中更為常見(jiàn)（中位OS未達(dá)到，而不是7.8個(gè)月；圖12d）。
圖12. 在晚期癌癥患者群中，MSS-CRC患者出現(xiàn)臨床療效的早期信號(hào)；圖a. 治療前患者的腫瘤樣本RNA-seq數(shù)據(jù)散點(diǎn)圖：橫軸表示對(duì)應(yīng)癌種在TCGA的相對(duì)腫瘤突變負(fù)荷，縱坐標(biāo)表示PD-L1歸一化的表達(dá)量；圖b. IFN-γ信號(hào)強(qiáng)度比較：TCGA樣本- MSS-CRC（n= 286）、MSI-CRC（n= 62）、胃（n= 406）、肺腺癌（肺Ad.）_（n= 498），肺鱗狀（肺平方平方）（n= 463）和黑色素瘤（n= 436），臨床研究患者-MSS-CRC（n= 7），GEA（n= 6）和NSCLC（n= 1）；圖c. 研究治療開始后ctDNA相對(duì)于基線水平的變化百分比，顯示為最佳反應(yīng)，并由基于RECIST的反應(yīng)和治療時(shí)間著色。藍(lán)色的患者均接受研究治療>24周，其中2例患者的治療超過(guò)了基于RECIST的進(jìn)展性疾病（PD），在24周后未得到證實(shí)，并繼續(xù)接受研究治療；圖d.自ChAd68啟動(dòng)以來(lái)，ctDNA減少（=4）或沒(méi)有減少（=3）的MSS-CRC患者的生存概率。數(shù)據(jù)截止日期：2022年1月31日；
病人G8,51歲的MSS-CRC患者接受化療21個(gè)月，進(jìn)入研究隊(duì)列前的一線化療存在腫瘤進(jìn)展，后期接受腫瘤新生抗原疫苗時(shí)繼續(xù)伴隨標(biāo)準(zhǔn)的化療方案，通過(guò)影像學(xué)評(píng)估腫瘤縮小和ctDNA降低。16周內(nèi)多個(gè)肺病變部位縮小，48周內(nèi)多個(gè)肺和一個(gè)肝臟病變部位持續(xù)縮?。▓D12e）。PET掃描成像顯示穩(wěn)定性肝病變組織中高代謝細(xì)胞降低（提示該疫苗方案的抗腫瘤活性沒(méi)有被計(jì)算機(jī)斷層掃描成像所證明）
PET（正電子發(fā)射斷層攝影）是新發(fā)展起來(lái)的核醫(yī)學(xué)檢查方法。掃描前先給病人注射一種標(biāo)記某種正電子的放射性制劑，從它們所參與的代謝過(guò)程來(lái)測(cè)定腦組織的代謝改變。是目前惟一可在活體上顯示生物分子代謝、受體及神經(jīng)介質(zhì)活動(dòng)的新型影像技術(shù)，現(xiàn)已廣泛用于多種疾病的診斷與鑒別診斷、病情判斷、療效評(píng)價(jià)、臟器功能研究和新藥開發(fā)等方面。
3. 展望
疫苗驅(qū)動(dòng)的T細(xì)胞應(yīng)答是(1)跨多重突變和HLA等位基因的多克隆，(2)具有多功能性，(3)能夠殺死呈現(xiàn)同源肽的靶細(xì)胞。值得注意的是，在接受低劑量samRNA的患者中觀察到T細(xì)胞反應(yīng)更一致的增加。
